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云芝多糖对小鼠黑色素瘤B16细胞体外增殖和凋亡的影响及其机制
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| 篇名： | 云芝多糖对小鼠黑色素瘤B16细胞体外增殖和凋亡的影响及其机制 |
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| 摘要： | 目的：研究云芝多糖（CVP） 对小鼠黑色素瘤B16细胞体外增殖、凋亡的影响及其机制。方法：采用MTT法测定以二甲基亚砜（DMSO，阴性对照）和0（空白对照）、0.156、0.312 5、0.625、1.25、2.5、5.0、10.0 μg/ml CVP分别培养细胞48、72 h后的细胞存活率，计算半数抑制浓度（IC50）；流式细胞术测定以DMSO（阴性对照）和0（空白对照）、0.5 μg/ml CVP 分别培养细胞24、48、72 h后的细胞凋亡率；实时荧光定量聚合酶链式反应法测定以DMSO（阴性对照）、0.5 μg/ml CVP培养细胞48、72 h后细胞中凋亡相关基因P53、Bcl-2、Fas mRNA的表达。结果：0.156～10.0 μg/ml CVP 对B16细胞的生长均有抑制作用，并在0.156～0.625 μg/ml范围内呈浓度和时间依赖性，培养48、72 h的IC50分别为（0.32±0.01）、（0.18±0.04） μg/ml。0.5 μg/ml CVP培养细胞24、48、72 h后，细胞凋亡率较阴性对照和空白对照均明显升高（P＜0.01）；0.5 μg/ml CVP培养细胞48、72 h后，细胞中P53、Bcl-2、Fas mRNA表达水平较阴性对照明显降低（P＜0.01）。结论：CVP可抑制小鼠B16细胞的增殖并诱导其凋亡，其机制可能与下调细胞中P53、Bcl-2和Fas基因的表达有关。 |
| ABSTRACT： | OBJECTIVE： To study the effects of Coriolus versicolor polysaccharides （CVP） on in vitro proliferation and apoptosis of murine melanoma B16 cell and its mechanism. METHODS： MTT assay was used to determine the survival rate of murine melanoma B16 cell after cultured with DMSO （negative control）， 0 （blank control）， 0.156， 0.312 5， 0.625， 1.25， 2.5， 5.0 and 10.0 μg/ml CVP for 48， 72 h， and the IC50 was calculated. Flow cytometry was used to determine the apoptotic rate of murine melanoma B16 cell after cultured with DMSO （negative control）， 0 （blank control）， 0.5 μg/ml CVP for 24， 48， 72 h. Quantitation Real-time PCR （qRT-PCR） was used to determine the mRNA expression of cell apoptosis-related gene P53， Bcl-2 and Fas in murine melanoma B16 cell after cultured with DMSO （negative control）， 0.5 μg/ml CVP for 48， 72 h. RESULTS： 0.156-10.0 μg/ml CVP could inhibit the growth of B16 cells， in concentration and time-dependent manner within 0.156-0.625 μg/ml； IC50 of B16 cells after cultured for 48 and 72 h were （0.32±0.01），（0.18±0.04） μg/ml. After cultured with 0.5 μg/ml CVP for 24， 48， 72 h， apoptotic rates of B16 cells were increased significantly， compared to negative control and blank control （P＜0.01）. After cultured with 0.5 μg/ml CVP for 48， 72 h， mRNA expression of P53， Bcl-2 and Fas were decreased significantly， compared to negative control （P＜0.01）. CONCLUSIONS： CVP can inhibit the proliferation and induce the apoptosis of B16 cells， the mechanism of which may be associated with the expression down-regulation of P53， Bcl-2 and Fas gene. |
| 期刊： | 2016年第27卷第31期 |
| 作者： | 魏士杰，陈文强 |
| AUTHORS： | WEI Shijie，CHEN Wenqiang |
| 关键字： | 云芝多糖；黑色素瘤B16细胞；增殖；凋亡；体外 |
| KEYWORDS： | Coriolus versicolor polysaccharides； Murine melanoma B16 cell； Proliferation； Apoptosis； in vitro |
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