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桔皮素对人肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭的影响及机制研究
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| 篇名： | 桔皮素对人肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭的影响及机制研究 |
| TITLE： | |
| 摘要： | 目的：考察桔皮素对人肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭的影响，并探讨其作用机制。方法：以0（空白对照组）、10、20、40、60、80 μmol/L桔皮素分别作用于细胞24、48 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖率，并计算其半数抑制浓度（IC50）。以0、20、30 μmol/L桔皮素作用细胞48 h后，采用Transwell侵袭实验考察其对细胞侵袭的影响；并分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应法和Western blot法考察其对细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、Notch-1、免疫细胞表面抗原44（CD44）、基质金属蛋白酶9（MMP-9） mRNA及其蛋白表达的影响；采用Western blot法考察蛋白激酶B（Akt）、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）的磷酸化水平。结果：10～80 μmol/L桔皮素对人肝癌HepG2细胞的体外增殖均具有明显的抑制作用，且呈时间和剂量依赖性，增殖率较空白对照组显著降低（P＜0.05），作用24、48 h后的IC50分别为55.7、23.4 μmol/L。20、30 μmol/L桔皮素作用48 h后，细胞侵袭能力明显受到抑制；细胞中N-cadherin、Vimentin 、Notch-1、CD44和MMP-9 mRNA及其蛋白水平表达明显降低，E-cadherin mRNA及其蛋白表达水平明显升高，且Akt、GSK-3β磷酸化水平升高，较空白对照组差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：桔皮素可抑制人肝癌HepG2细胞的体外增殖和侵袭；其机制可能与下调细胞中Notch-1表达、抑制细胞的上皮-间质转化而抑制CD44和MMP-9的表达，以及抑制其上游Akt-GSK-3β信号途径有关。 |
| ABSTRACT： | OBJECTIVE： To investigate the effects of tangeretin on in vitro proliferation and invasion of human hepatocellular carcinoma HepG2 cells， and to investigate its mechanism. METHODS： After treated with 0 （blank control group）， 10， 20， 40， 60， 80 μmol/L tangeretin for 24， 48 h， the rate of cell proliferation was detected by CCK-8 assay， and IC50 was calculated. After treated with 0， 20， 30 μmol/L tangeretin for 48 h， Transwell invasion test was used to investigate the effects of tangeretin on cell invasion. The effects of tangeretin on mRNA and protein expression of E-cadherin， N-cadherin， Vimentin， Notch-1， CD44 and MMP-9 were determined by RT-PCR and Western blot assay. The phosphorylation of Akt and GSK-3β were investigated by Western blot assay. RESULTS： 10-80 μmol/L tangeretin significantly inhibited in vitro proliferation of human hepatocellular carcinoma HepG2 cells in time and dose-dependent manner； proliferation rates of them were significantly lowered， compared to blank control group （P＜0.05）； IC50 were 55.7， 23.4 μmol/L after treated for 24， 48 h. After treated with 20， 30 μmol/L tangeretin for 48 h， cell invasion was inhibited in HepG2 cells； mRNA and protein expression of N-cadherin， Vimentin， Notch-1， CD44 and MMP-9 decreased significantly， while those of E-cadherin increased significantly； the phosphorylated levels of Akt and GSK-3β increased； there was statistical significance between them and blank control group （P＜0.05）. CONCLUSIONS： Tangeretin can inhibit in vitro proliferation and invasion of human hepatocellular carcinoma HepG2 cell， which may be associated with inhibiting the expression of CK44 and MMP-9 and signal pathway of upstream Akt-GSK-3β through up-regulating the expression of Notch-1 and inhibiting epithelial-mesenchymal transition. |
| 期刊： | 2016年第27卷第34期 |
| 作者： | 孙志欣，张莹 |
| AUTHORS： | SUN Zhixin，ZHANG Ying |
| 关键字： | 桔皮素；人肝癌HepG2细胞；增殖；侵袭；上皮-间质转化 |
| KEYWORDS： | Tangeretin； Human hepatocellular carcinoma HepG2 cells； Proliferation； Invasion； Epithelial-mesenchymal transition |
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